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CULTURE EN MILIEU CLOS

Definition

(Culture fermée) Forme de culture dans laquelle un volume de milieu nutritif liquide adéquat est inoculé de cellules (bactériennes ou algues unicellulaires), et incubé pendant une période appropriée. Les cellules qui se développent ainsi sont soumises à une évolution constante des caractéristiques du milieu, due à l'épuisement des substances nutritives et à l'accumulation de déchets métaboliques, parmi d'autres facteurs. La courbe de croissance d'une telle culture est essentiellement composée de quatre phases principales. Dans la première phase, ou phase de latence, la croissance (taux d'augmentation du nombre de cellules ou de la biomasse) est d'abord minimale, mais augmente ensuite à un taux stationnaire dicté par les conditions de culture (température, concentration de substances nutritives etc.). La durée de cette phase est variable et dépend des caractéristiques de l'inoculum. Si un milieu riche, capable de soutenir une croissance rapide, est inoculé avec des cellules se divisant lentement issues d'un milieu pauvre, par exemple, la phase de latence est relativement longue à cause du temps nécessaire aux cellules pour s'adapter au nouveau milieu. Pendant cette phase, la croissance des cellules n'est pas équilibrée. Suite à la phase de latence, les cellules subissent une augmentation progressive du taux de croissance avant d'atteindre une phase pendant laquelle le taux de croissance est constant et maximal (pour un organisme donné et pour des conditions de culture données) appelée phase exponentielle (= phase logarithmique). Pendant cette phase l'augmentation du nombre de cellules et celle de la biomasse sont exponentielles et la croissance est dite "équilibrée". A la fin de cette phase, le taux de croissance diminue et les cellules entrent dans la phase stationnaire, pendant laquelle la croissance est égale à zéro. Le nombre de cellules viables est maximal pendant cette phase. Dans la phase lytique qui suit, le nombre de cellules viables diminue, à la suite de l'épuisement des substances nutritives.

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